Wysalanie białek
Z Wikipedii
Wysalanie białek - tzw. wypadanie białek z roztworu. Polega na uszkodzeniu otoczki solwatacyjnej inaczej agregacji cząsteczek białek, która jest możliwa dzięki temu, że między polarne grupy w strukturze białka, wprowadzamy bardzo dobrze zdysocjowane i zhydratowane jony soli nieorganicznych.Ważne jest, by dodawana sól, była solą metalu lekkiego (wyjątek KCl!). Proces ten nie narusza struktury IV, III, II ani tym bardziej I białka, więc jest odwracalny (koagulacja, przejście zolu w żel).
Inaczej: Metoda wytrącania i rozdziału białek polegająca na dodaniu do roztworu odpowiedniej ilości siarczanu amonu; wysalanie białka jest procesem odwracalnym, nie powoduje denaturacji; białko najłatwiej wysolić w punkcie izoelektrycznym.
Wysalanie białka jaja kurzego (oddzielenie albumin od globulin):
- Do 15cm3 roztworu białka jaja kurzego dodać 15cm3 nasyconego roztworu (NH4)2SO4 i zmieszać. Strąca się kłaczkowaty osad globulin.
- Osad odsączyć (lub odwirować) i pozostawić do dalszego doświadczenia, a przesącz zebrać w niewielkiej zlewce.
- Do przesączu dodawać małymi porcjami stały sproszkowany siarczan(VI) amonu do stanu nasycenia, tj. tak długo, dopóki na dnie zlewki pozostaje kilka kryształów nie rozpuszczonej soli. Z roztworu wydziela się osad albumin.
- Oddzielić osad przez odsączenie lub odwirowanie.
- Do każdego osadu – globulin i albumin – oddzielnie, dodać wody destylowanej Obserwuje się rozpuszczenie osadów. Z każdym roztworem wykonać próbę biuretową.
